豬（Porcine）輪狀病毒抗體（RV-Ab）檢測(cè)原理

試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被輪狀病毒抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中輪狀病毒抗體（RV-Ab）的存在與否。

豬（Porcine）輪狀病毒抗體（RV-Ab）試劑盒組成

名稱(chēng)	96孔配置	48孔配置	備注
微孔酶標(biāo)板	12孔×8條	12孔×4條	無(wú)
陰性對(duì)照	0.5mL	0.5mL	無(wú)
陽(yáng)性對(duì)照	0.5mL	0.5mL	無(wú)
檢測(cè)抗原-HRP	10mL	5mL	無(wú)
20×洗滌緩沖液	25mL	15mL	按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
樣本稀釋液	6mL	3mL	無(wú)
底物A	6mL	3mL	無(wú)
底物B	6mL	3mL	無(wú)
終止液	6mL	3mL	無(wú)
封板膜	2張	2張	無(wú)
說(shuō)明書(shū)	1份	1份	無(wú)
自封袋	1個(gè)	1個(gè)	無(wú)

豬（Porcine）輪狀病毒抗體（RV-Ab）操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL；

3.  待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；

4.  隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗原100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

豬（Porcine）輪狀病毒抗體（RV-Ab）結(jié)果判斷

 1.  試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；

                陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽(yáng)性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽(yáng)性

豬（Porcine）輪狀病毒抗體（RV-Ab）試劑盒性能

1.  準(zhǔn)確性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15，說(shuō)明試驗(yàn)結(jié)果有效。

2.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

3.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

4.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

5.  有效期：6個(gè)月

上海舒話(huà)生物是一家集科研、生產(chǎn)、銷(xiāo)售為一體的生物，以科研試劑生產(chǎn)、診斷試劑原料供應(yīng)產(chǎn)品生產(chǎn)為核心，致力于為全球來(lái)自高等院校、政府研究機(jī)構(gòu)、診斷試劑生產(chǎn)廠家以及生物公司的廣大客戶(hù)們提供高質(zhì)量生物產(chǎn)品，產(chǎn)品擁有質(zhì)量保證，有問(wèn)題免費(fèi)包換，還可以免費(fèi)代測(cè)，想進(jìn)一步了解我們的產(chǎn)品歡迎您前來(lái)詳詢(xún)。